電泳儀技術(shù)是分子生物學(xué)研究*的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類(lèi),自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類(lèi)電泳目前已很少使用。而區帶電泳則需用各種類(lèi)型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。
所謂電泳,是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場(chǎng)中運動(dòng)速度不同,根據這一特征,應用電泳儀便可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或將一定混合物進(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備,這在實(shí)驗研究中具有極其重要的意義。下面簡(jiǎn)單介紹其使用方法、注意事項及常見(jiàn)問(wèn)題的解決方法。
一、使用方法
1、首先用導線(xiàn)將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。
2、電泳儀電源開(kāi)關(guān)調至關(guān)的位置,電壓旋鈕轉到小,根據工作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流范圍。
3、接通電源,緩緩旋轉電壓調節旋鈕直到達到的所需電壓為止,設定電泳終止時(shí)間,此時(shí)電泳即開(kāi)始進(jìn)行。
4、工作完畢后,應將各旋鈕、開(kāi)關(guān)旋至零位或關(guān)閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。
二、注意事項
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2、儀器通電后,不要隨時(shí)增加或撥掉輸出導線(xiàn)插頭,以防短路現象發(fā)生,雖然儀器內部附設有保險絲,但短路現象仍有可能導致儀器損壞。
3、由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過(guò)的電流量也不同,其電泳動(dòng)速度及電泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4、在總電流不超過(guò)儀器額定電流時(shí)(大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩壓狀態(tài)下空載開(kāi)機,但在穩流狀態(tài)下必須先接好負載再開(kāi)機,否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機器損壞。
6、使用過(guò)程中發(fā)現異?,F象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。
三、常見(jiàn)問(wèn)題及其解決方法
1、電泳儀的輸出為何達不到設定值?
答:①電泳儀的輸出狀態(tài)遵守“循歐姆定律”:電壓U=電流I×(電泳槽)電阻R相對不變的情況下,U、I、P(功率P=電流I×電壓U)中任意一個(gè)參數恒定,其他參數也隨之恒定;而任意一個(gè)參數變化,其他參數也隨之正比變化;②如果電泳儀的輸出電壓U達不到預置值,應首先觀(guān)察I或P是否已經(jīng)恒定,或者已經(jīng)達到電泳儀所規定的大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標志)。如果尚未達到極限值,將已經(jīng)恒定I或P的設置調大(有必要的話(huà)限值),才能夠提高電壓輸出;③如果電泳儀的電流I達不到預置值,可調整電壓U或功率P;④如果電泳儀的功率P達不到預置值,可調整電壓U或電流I。
2、電腦控制電泳儀發(fā)生過(guò)壓報警現象,怎么辦?
答:①檢查是否空載使用;②是否電泳槽未加緩沖液;③是否電泳槽鉑金絲斷。
3、發(fā)生過(guò)流保護的原因?
答:①查是否存在電泳槽短路現象;②查緩沖液是否選錯。
4、發(fā)生漏電保護的原因?
答:①是否有液體濺入儀器內部或輸出接口上;②是否有很多灰塵落入儀器內部。
5、風(fēng)機停轉或發(fā)出異響,怎么辦?
答:更換風(fēng)機。
6、電壓、電流沒(méi)有輸出,怎么辦?
答:①檢查保險管是否損壞;②打開(kāi)機箱檢查前面板輸出座與主板連接的插頭是否脫落;③檢查瓷罐變壓器的插頭是否脫落或用萬(wàn)用表檢查每組兩端應為通路。