來(lái)自能移植的大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞。這些細胞表達神經(jīng)生長(cháng)因子(NGF)受體。NGF可誘導產(chǎn)生神經(jīng)表型。這些細胞不合成腎上腺素。PC-12(高分化)“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細Chemicalbook胞傳代后，一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段：游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數／100個(gè)細胞。一般細胞分裂指數介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力好時(shí)期，稱(chēng)指數增生期(對數生長(cháng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗。
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞培養操作步驟：
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%Z醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片浸在培養液中;
5.將培養板在5%CO2水浴孵箱中37°C孵育2-3天，當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí)，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明：
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄，易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過(guò)大，以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
掃一掃，關(guān)注微信
當前位置：