MB50018.1.1 v.A
細胞脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
主要用途
細胞脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過(guò)脊髓過(guò)氧化酶反應系統中底物還原性愈創(chuàng )木酚,經(jīng)過(guò)過(guò)氧化反應后,產(chǎn)生的吸光值變化,即采用比色法來(lái)測定細胞樣品中酶活性的*而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗證明的。其適用于各種動(dòng)物或人體細胞裂解萃取樣品脊髓過(guò)氧化酶(MPO)的總活性檢測。產(chǎn)品嚴格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩定。
技術(shù)背景
脊髓過(guò)氧化酶(myeloperoxidase;MPO;EC1.11.1.7)是一種高度陽(yáng)離子糖基化血紅素蛋白(hemeprotein),由兩個(gè)雙體通過(guò)二硫鍵連接在一起。每個(gè)雙體由一個(gè)重鏈亞體(53kd)和一個(gè)輕鏈亞體(15kd)構成。其總分子量為144kd。脊髓過(guò)氧化酶存在于多形核白細胞的嗜天青顆粒(azurophilic granule)中,尤其在中性白細胞和單核細胞中。脊髓過(guò)氧化酶通過(guò)使用過(guò)氧化氫,氧化芳香類(lèi)化合物,產(chǎn)生自由基,達到抗菌作用。脊髓過(guò)氧化酶可以催化氯離子的過(guò)氧化作用,生成非自由基次綠酸(hypochlorite)。脊髓過(guò)氧化酶參與機體的天然防御機制,但是一旦失控,則會(huì )產(chǎn)生組織損害和炎癥反應。脊髓過(guò)氧化酶的活性檢測可以用來(lái)評價(jià)和診斷心血管疾病狀況?;诘?/span>物還原性愈創(chuàng )木酚(guaiacol或2-o-methoxyphenol),作為氫的供體,在過(guò)氧化氫的參與下,受到脊髓過(guò)氧化酶的過(guò)氧化催化,成為氧化性愈創(chuàng )木酚,而發(fā)生吸光值的增高(470nm波長(cháng)),來(lái)定量測定脊髓過(guò)氧化酶的活性。脊髓過(guò)氧化酶反應系統為:
myeloperoxidase
2 (reduced guaiacol) + H2O2 → 2 (oxidized guaiacol) + 2H2O
產(chǎn)品內容
清理液(Reagent A) 120毫升
裂解液(Reagent B) 10毫升
緩沖液(Reagent C) 20毫升
底物液(Reagent D) 1毫升
氧化液(Reagent E) 1毫升
陰性液(Reagent F) 500微升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存 裂解液(Reagent B)和 底物液(Reagent D)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里; 底物液(Reagent D)避免光照,有效保證6月
用戶(hù)自備
1.5毫升離心管:用于反應液配制以及樣品制備和保存的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器
細胞刮脫棒:用于細胞脫離
微型臺式離心機:用于樣品制備
培養箱:用于孵育反應物
比色皿或96孔板:用于比色的容器
分光光度儀或酶標儀:用于比色分析
實(shí)驗步驟
[(樣品讀數-背景讀數)X 1.0(體系容量;毫升)X 樣品稀釋倍數]÷[0.1(樣品容量;毫升)X 26.6(毫摩爾吸光系數)X 5(反應時(shí)間;分鐘)]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克
單位=微摩爾愈創(chuàng )木酚/分鐘
[(樣品讀數-背景讀數)X 0.25(體系容量;毫升)X 樣品稀釋倍數]÷[0.025(樣品容量;毫升)X 26.6(毫摩爾吸光系數)X 0.6(光徑距離;厘米)X 5(反應時(shí)間;分鐘)]=單位/毫升÷(稀釋后樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克
單位=微摩爾愈創(chuàng )木酚/分鐘
注意事項
質(zhì)量標準
電話(huà)
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