蘇木素伊紅染色液試劑盒體外診斷試劑原理分析報告

　　蘇木素伊紅染色液試劑盒體外診斷試劑是一種堿性染料，同媒染劑（常用的是三價(jià)的鐵或鋁的鹽）一起使用，能夠使細胞核染色。蘇木素和氧化蘇木素都沒(méi)有染色能力，但與媒染劑結合形成色淀（lake），這種色淀具有染色能力。核、染色體、著(zhù)絲粒、中心體、線(xiàn)粒體、髓鞘等可被染成藍色以至黑色。與伊紅合用的蘇木素-伊紅雙重染色法是zui基本的一般組織的染色法，蘇木素染色原理如下：
　　蘇木素和伊紅在組織學(xué)上被經(jīng)常使用，碘液不同，這是一種*染色街。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑，也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物。蘇木素染色劑經(jīng)常為組織的研究使用。明礬和三價(jià)鐵鹽常常被用作媒染劑，展示核和細胞質(zhì)結構。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑－染料－組織復合體，從而顯示顏色。
　　蘇木素染色內質(zhì)呈淡藍黑色，外質(zhì)收縮，剩下部分不著(zhù)色或色澤更淺。圓形細胞核呈藍黑色。居中的核仁呈黑色小圓點(diǎn)。核膜較薄，其內側緣均勻，整齊地排列著(zhù)一層細小的染色質(zhì)粒。核仁與核膜之間可見(jiàn)到核網(wǎng)。被吞噬的紅細胞呈藍黑色采用蘇木素染色液進(jìn)行免疫染色后的復染，操作步驟簡(jiǎn)便，操作時(shí)間短?？梢圆僮鞑襟E簡(jiǎn)便，操作時(shí)間短或培養細胞的染色，或與免疫組織化學(xué)、免疫細胞化學(xué)、免疫熒光、原位雜交等配合使用。使用蘇木素染色液染色后還可以進(jìn)行免疫染色或其它染料的復染。
　　蘇木素伊紅染色液試劑盒體外診斷試劑原理很簡(jiǎn)單，蘇木素染色法也是常用的一種染色方法。木素染色后的細胞核呈現藍色，細胞漿呈現粉紅色或紅色。染色液也可以重復使用，直至認為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。
　　1、蘇木素復染時(shí)間的把握？
　?。?）蘇木素復染時(shí)間要看當時(shí)的室溫、溶液的新舊、目標抗原的定位等情況，一般數秒-數分鐘。不過(guò)這個(gè)如果染色不理想可以補救的。即：染色深則分化時(shí)間稍長(cháng)些即可；染色淺則再置于蘇木素中染色即可。
　?。?）鹽酸酒精是分化，氨水是返蘭。作用不同。片子復染完后流水振洗，然后置于鹽酸酒精中數秒（一定動(dòng)作要快）后拿出流水振洗，在放入氨水中返蘭即可。
　?。?）如果分化的顏色過(guò)淺，可以復置于蘇木素中染色。
　　2、蘇木素伊紅染色液試劑盒體外診斷試劑復染后氨水返藍這一步如何做、濃度多少、時(shí)間多長(cháng)?
　　答：返藍可以用堿性溶液（PBS/NA2HPO4/淡氨水）或45度溫水、冷水藍化均可。一般藍化5~10 min。淡氨水有人用50ml自來(lái)水＋三四滴的氫氧化銨。
　　3、DAB顯色時(shí)間如何把握？
　?。?）DAB顯色時(shí)間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間，到出現淺棕色本底時(shí)即可沖洗；
　?。?）DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現很深的棕褐色，這很可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)高或抗體孵育時(shí)間過(guò)長(cháng)，需要下調抗體濃度或縮短你的抗體孵育時(shí)間；
　?。?）此外，若很短時(shí)間就出現背景很深，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全，需要延長(cháng)封閉時(shí)間；
　?。?）DAB顯色時(shí)間很長(cháng)（如超過(guò)十幾分鐘）才出現陽(yáng)性染色，一方面可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)低或孵育時(shí)間過(guò)短（一抗4度過(guò)夜）；另一方面就是封閉時(shí)間過(guò)長(cháng)。